小議應用微柱凝膠法鑒定新生兒血型
【摘要】 目的探討卡式微柱凝膠血型鑒定法在鑒定新生兒血型中的應用。方法選取100份新生兒外周血標本，采用鹽水試管法和卡式微柱凝膠法同時進行ABO和Rh(D)血型鑒定。結果試管法正定型符合率98%，微柱凝膠法正定型符合率100%。結論微柱凝膠法檢測新生兒的ABO和Rh(D)血型時優于傳統試管法。
【關鍵詞】 微柱凝膠法;新生兒;血型
由于新生兒的ABO血型抗原較成年人弱，約只有成人的1/4，且含有來自母體的抗體，免疫反應相對較弱[1]，故血型血清學的檢測難度較大，所以新生兒血型只能由檢測紅細胞抗原正定型來鑒定其ABO血型。長期以來人們一直沿用的手工法操作不易標準化，且干擾因素較多，血型錯檢時有發生，1986年Lapierre發明了微柱凝膠技術并用于鑒定血型，該方法具有易于自動化、標準化、反應結果可靠和特異性強等特點，在許多醫院和血站被應用[2] 。該系統的基本原理是通過微小的凝膠顆粒構成的濾網在系統內控制離心的條件下，將凝集的紅細胞和游離的紅細胞分離開來，從而形成不同的反應圖譜，再通過系統的自動判讀裝置判斷血型[3]。自2010年開始本院檢驗科采用該技術鑒定新生兒血型，在結果的準確性和操作的方便性上都有了很大程度的提高。
1材料與方法
1.1標本來源
100例標本來自2010年1月—2011年8月本院新生兒病房，每名新生兒抽EDTA抗凝血2ml。
1.2試劑與儀器
微柱凝膠血型卡(DianaGel Confirm)、離心機由北京斑珀斯技術技貿有限公司提供。抗A、抗B血型定型試劑由長春生物制品研究所提供，Rh抗D血型定型試劑由上海血液生物制品研究所提供。
1.3檢測方法
鹽水試管法參照《全國臨床檢驗操作規程》[4]，取受檢者5%紅細胞懸液20μl，抗-A、抗-B、抗-D血清各100μl，混勻，3200r/min離心15s，顯微鏡觀察結果，鏡下凝集者應判為陽性。
1.4微柱凝膠法
將病人EDTA抗凝血充分離心3000轉/5min，取紅細胞50μl加生理鹽水1ml制成5%的紅細胞懸液。撕開卡上的錫紙膜，在A-B-D-ctl四個孔內分別懸空加入病人5%紅細胞懸液10μl，將卡放在專用離心機中離心9min，離心結束后在白色背景下觀察結果。
2結果
微柱凝膠法正定型結果凝集強度全部達到3+以上，錯檢率為0;鹽水試管法凝集強度達到3+以上為95%，結果為散在凝集需借助顯微鏡確定為3%，有2例錯檢，后經證實與微柱凝膠法結果一致。
3討論
卡式微柱凝膠法是1986年Lapierre發明的一項免疫學檢測新技術，是微柱凝膠技術與以往血型鑒定技術相結合的產物，其敏感度高，可用于臨床困難血型的鑒定，經過不斷的改進和大量的臨床應用，在許多發達國家此技術已作為常規的紅細胞血型血清學檢測技術應用于臨床。新生兒的ABO血型抗原較成人弱，約只有成人的1/4 ，其ABO抗原弱的原因并非缺少糖苷轉移酶，而是由于紅細胞上酶的底物少。新生兒可以從母親獲得IgG ABO抗體，但IgM ABO抗體卻在出生3～6個月后才合成[5]。微柱凝膠正定型具有檢測敏感性高、特異性強、結果準確、易于觀察、影響因素少的特點，特別是對抗原較弱的新生兒紅細胞抗原檢測更表現出其優越性。試驗中出現的3例抗原性弱的、需借助顯微鏡確定的標本，就都是由于A或B抗原極弱，用傳統的試管法鑒定血型時，傳統試管法的鏡下凝集需借助顯微鏡觀察，操作繁雜且有一定的困難。微柱凝膠法能用肉眼直接觀察到極弱的陽性反應(±)，能使肉眼不易察覺的凝集(鏡下1～3個紅細胞的凝集)明顯化。本次實驗結果表明，對于血型抗原減弱的新生兒，應用微柱凝膠法能夠成功準確地檢測出其ABO血型，較之傳統的試管法準確、簡便、快捷、安全，也減少了實驗人員接觸血液的機會，易于批量使用，尤其適合兒科和新生兒科標本的檢測。
【參考文獻】
1羅春麗，劉體全. 臨床檢驗基礎，第2版. 北京:人民衛生出版社，1997：97.
2Lapierre Y，Rigal D，Adam J，et al.The gel test:a newway to detect red cell antigen antibody reactions.Transfusion，1990，30:109-113.
3Tills D，Bushrod J，Ward DJ，et al.Typing of normal and variant red cells with ABO，RH，and Kell typing reagents using a gel typing system.Immunohematology，1991，7:94.
4葉應嫵，王毓三，申子瑜. 全國臨床檢驗操作規程，第3版.南京：東南大學出版社，2006：246.
5Mollison PL.Blood transfusion in clinical medicone.London:Blackwell Scientific Publication，1979：243.
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