七種食(藥)用菌的超濾分級分離
本論文是一篇關于七種食(藥)用菌的超濾分級分離的優秀論文,對正在寫有關于多糖論文的寫作者有一定的參考價值和指導作用。
摘要:運用超濾技術對7種食(藥)用菌多糖水提液進行分級分離,將提取物分成>5×105 Da、1×105~5×105 Da、1×104~1×105 Da、< 1×104 Da 4個不同分子量段的部分,計算不同部分的得率,探討超濾分離食(藥)用菌多糖的可行性。
關鍵詞:超濾; 食(藥)用菌; 提取; 子實體
超濾(Ultra-filtration)技術是20世紀60～70年代發展起來的,通過膜表面的微孔結構對物質進行選擇性分離,小分子溶質透過膜,而大分子物質則被截留,原液中大分子濃度逐漸提高,從而實現大、小分子的分離、濃縮或凈化。與傳統的分離技術如蒸餾、吸附、萃取等相比,膜分離技術具有分離效率高、能耗低、操作簡單、環保的特點。目前超濾技術已在水處理、食品飲料、酒類、醫藥工業、生物工程、金屬加工、表面涂裝等眾多領域應用,被公認是當代最有前途的高新技術之一。
近年來,超濾工藝也越來越多地用于食(藥)用菌領域,特別是真菌多糖的提取、分離和純化。超濾技術與傳統水提醇沉工藝相比具有很多優點,如有效多糖的比例增加,避開使用乙醇,降低了成本。本文對7種食(藥)用菌水提物分別用截留值不同的膜超濾,計算不同分子量段的得率,為食(藥)用菌的超濾工藝提供參考。
1、 材料與策略
1.1材料
雞腿菇(Coprinus comatus)、灰樹花(Grifola frondosa)、猴頭菇(Hericium erinaceus)、姬松茸(Agaricus blazei)、靈芝(Ganoderma lucidum)子實體和豬苓(Polyporus umbellatus)、茯苓(Poria cocos)菌核干品均購于浙江磐安食用菌市場。
1.2儀器設備
UF202型超濾裝置購于上海弗立特實業有限公司,PowerDry PL3000冷凍干燥機購于丹麥HETO公司。
1.3超濾工藝
樣品(4 kg)粉碎后,加入15倍蒸餾水(w/v)浸泡30 min,煮沸后保持微沸1 h,過濾后濾渣中再加入10倍水(w/v),重復提取1次。合并兩次濾液,分別上截留值為5×105 Da、1×105 Da和1×104 Da的超濾系統,將食(藥)用菌水提物按照分子量大小分為4部分(> 5×105 Da、1×105~5×105 Da、1×104~1×105 Da、< 1×104 Da),加熱濃縮,冷凍干燥,稱重,計算得率。
2、結果與分析
7種食(藥)用菌樣品粗提物超濾后在不同分子量段的得率和所占比率見表1。由于不同的食(藥)用菌木質化的程度不同,各個組分得率的差別較大,木質化程度低的姬松茸和雞腿菇的各部分得率比較高,而木質化程度高的豬苓和茯苓得率都比較低。
7種食(藥)用菌粗提物超濾濃縮后在<1×104 Da的部分所占比率都最高,基本都在50%以上,其中雞腿菇和灰樹花的比例分別達到了87.1%和79.7%。1×105~5×105 Da的部分所占比率是4個部分中最低的,> 5×105 Da和1×104~1×105 Da的部分相對較多。由于我們研究的多糖大多是>1×104 Da的部分,因此>1×104 Da的多糖主要集中于> 5×105 Da或1×104~1×105 Da之間。
3、 討論
超濾技術越來越多地被應用于有效成分的分離純化中,可以簡化工藝,節約成本。同樣在食(藥)用菌的提取分離中,通過超濾工藝可以快速將食(藥)用菌按不同的分子量段進行有效的分離純化,得到所需分子量段的多糖,可以簡化分離純化的步驟。在實驗室工作中可以針對目標多糖進行有選擇的超濾,去除不需要的部分,以縮短分離純化的時間和程序。
傳統的食用菌多糖生產工藝為水提醇沉法,即用熱水提取濃縮后加乙醇沉淀,得到的沉淀部分為食用菌粗多糖,沉淀部分的重量一般為總水提物的50%左右,而從實驗數據可以發現,如用1×104 Da膜進行超濾后得到的多糖得率遠遠低于水提醇沉,但其多糖的含量要高于傳統的水提醇沉策略,但在生產上由于損失了一部分< 1×104 Da的多糖,目前在大生產中的應用還不多。當然也可以考慮用更小分子量的膜進行截流,以減少損失,但由于超濾工藝的優點,對于特定分子量范圍的多糖純化具有優勢。
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